 |
Gold Rt PCR Reverse Transcriptase R3001 2000U R3002 10000U
Thông tin chi tiết sản phẩm:
| Nguồn gốc: | Trung Quốc |
| Hàng hiệu: | GDSBio |
| Chứng nhận: | / |
| Số mô hình: | R3001/R3002 |
Thanh toán:
| Số lượng đặt hàng tối thiểu: | 1 túi |
|---|---|
| chi tiết đóng gói: | gói nhỏ hoặc phân phối số lượng lớn hoặc OEM |
| Thời gian giao hàng: | 8 ngày làm việc |
| Điều khoản thanh toán: | L/C, D/A, D/P, T/T, Western Union, MoneyGram |
| Khả năng cung cấp: | 100 túi/túi mỗi ngày |
|
Thông tin chi tiết |
|||
| Con mèo. KHÔNG.: | R3001/R3002 | Sự tập trung: | R3001(2,000U) R3002(10,000U) |
|---|---|---|---|
| Vẻ bề ngoài: | không màu | Nhóm: | Thuốc thử PCR phiên mã ngược |
| Hoạt động: | Vượt qua | khả năng khuếch đại: | / |
| In logo: | Với In Logo | Gói vận chuyển: | đóng gói |
| Khả năng sản xuất: | 100 túi/túi mỗi ngày | Điều kiện bảo quản: | Bảo quản ở -20°C |
| Điểm nổi bật: | Phiên mã ngược rt pcr vàng,rt pcr sao chép ngược 2000U,2000U sao chép ngược pcr và pcr thời gian thực |
||
Mô tả sản phẩm
Phiên mã ngược vàng R3001(2,000U) R3002(10,000U)
gphiên mã ngược cũ
Chỉ dùng cho nghiên cứu
Các thành phần
| Thành phần | R3001 (2,000 bạn) | R3002(10,000 bạn) |
| Bộ đệm vàng 5 × | 100 μl | 500 μl |
| Phiên mã ngược vàng (200 U/μl) | 10 μl | 50 μl |
Kho
Thuốc thử này nên được giữ ở -30~15°C.
Sự miêu tả
Gold Reverse Transcriptase là một enzyme phiên mã ngược mới thu được bởitrong ống nghiệmtiến hóa phân tử dựa trên M-MLV (RNase H-) Reverse Transcriptase.Chuỗi cDNA đầu tiên có thể được tổng hợp ở 37~55°C.Gold Reverse Transcriptase đã cải thiện đáng kể độ nhạy, độ đặc hiệu, độ ổn định nhiệt và thời gian bán hủy, rất phù hợp để sao chép ngược các mẫu RNA có cấu trúc thứ cấp phức tạp.Gold Reverse Transcriptase có khả năng trùng hợp và mở rộng mạnh hơn, có thể được sử dụng để tổng hợp cDNA dài và xây dựng tỷ lệ cao thư viện cDNA có độ dài đầy đủ.
bạncon chítĐ.định nghĩa
Poly (rA)·Oligo (dT) đã được sử dụng làm khuôn mẫu/lớp lót.Ở 37°C trong 10 phút, lượng enzyme cần thiết để thêm 1nmol dTTP dưới dạng chất không tan trong axit được xác định là 1 đơn vị hoạt động (U).
Hỏichất lượngCkiểm soát
Phát hiện dư lượng exonuclease: 200 U của sản phẩm này và 50 pmol cơ chất DNA sợi đơn được ủ ở 37°C trong 16 giờ và dải điện di DNA không thay đổi sau điện di TRANG WEB biến tính.
Phát hiện dư lượng endonuclease: 200 U của sản phẩm này và 0,3 μg DNA pBR322 được ủ ở 37°C trong 4 giờ và các dải điện di của plasmid không bị thay đổi bởi điện di trên gel agarose.
Phát hiện dư lượng RNase: sản phẩm của 200 U và 1 μg RNA của 293 tế bào được ủ ở 37°C trong 30 phút và dải điện di của RNA không thay đổi bằng điện di trên gel agarose.
E coliPhát hiện dư lượng DNA: dư lượng axit nucleic trong 60 U được phát hiện bằnge.coliTaqMan qPCR dành riêng cho gDNA và phần còn lại củae.colibộ gen ít hơn 10 bản sao.
Phát hiện chức năng Enzyme 1: 200 U được thêm vào hệ thống phiên mã ngược, 1 μg RNA tổng số tế bào HeLa được sử dụng làm khuôn mẫu, Oligo (dT)23làm mồi và phản ứng được tiến hành ở 50°C trong 45 phút.1/10 Sản phẩm cDNA được lấy để khuếch đại PCR củasố VINgien.Điện di trên gel agarose với nhuộm EB cho thấy một dải 4,6 kb.
Phát hiện chức năng 2: Enzyme 200 U được thêm vào hệ thống phiên mã ngược, RNA tổng số tế bào 1 pg HeLa được sử dụng làm khuôn mẫu, Oligo (dT)23làm mồi, và phản ứng được tiến hành ở 50°C trong 30 phút.1/10 sản phẩm cDNA được lấy để khuếch đại PCR củaGAPDHgien.Điện di trên gel agarose với nhuộm EB cho thấy một dải 550 bp.
Phát hiện chức năng 3: 500 ng RNA tổng số tế bào HeLa làm mẫu, Oligo (dT)23VN làm mồi, phản ứng 50°C trong 45 phút.1/10 sản phẩm cDNA được lấy để khuếch đại PCR củaPolεgen. Điện di trên gel agarose, nhuộm EB, có thể nhìn thấy một dải 7,1 kb (giàu gc).
Các vấn đềNlàm cỏMỘTchú ý
Ngăn chặn ô nhiễm RNase
Vui lòng giữ cho khu vực thí nghiệm sạch sẽ. Nên đeo găng tay và khẩu trang sạch trong quá trình vận hành.Phải đảm bảo không có RNase đối với các ống ly tâm, đầu hút pipet và các vật tư tiêu hao khác được sử dụng trong thí nghiệm.
Mồi chọnion
Thí nghiệm tiếp theoTôis PCR
Nếu khuôn mẫu có nguồn gốc từ sinh vật nhân thực, Oligo dT thường được ưu tiên hơn, được ghép nối với đuôi 3' Poly A của mRNA nhân chuẩn để tạo ra cDNA chiều dài đầy đủ tối đa.
Đoạn mồi đặc hiệu gen (GSP) có độ đặc hiệu cao nhất. Tuy nhiên, trong một số trường hợp, GSP được sử dụng cho phản ứng PCR không thể hướng dẫn hiệu quả quá trình tổng hợp chuỗi cDNA đầu tiên. Tại thời điểm này, phiên mã ngược có thể được thực hiện lại bằng cách sử dụng Oligo dT hoặc Random hexamer.
Các hexamer ngẫu nhiên có độ đặc hiệu thấp nhất và tất cả RNA, bao gồm cả mRNA, rRNA và tRNA, có thể được sử dụng làm mẫu cho các hexamer ngẫu nhiên. Các hexamer ngẫu nhiên có thể được sử dụng làm mồi khi vùng đích có cấu trúc thứ cấp phức tạp hoặc hàm lượng GC cao , hoặc khi khuôn mẫu là sinh vật nhân sơ và việc sử dụng Oligo dT hoặc đoạn mồi dành riêng cho gen (GSP) không thể hướng dẫn tổng hợp cDNA một cách hiệu quả.
Thí nghiệm tiếp theoTôiSqPCR
Oligo dT trộn với Random hexamers dẫn đến hiệu quả tổng hợp cDNA giống nhau ở từng vùng của mRNA, giúp cải thiện tính xác thực và độ lặp lại của kết quả định lượng.
Dongsheng Biotech cung cấp các dòng sản phẩm khác nhau để giúp bạn đạt được thành công trong PCR.Đối với enzyme, Taq Polymerase, HS Taq DNA Polymerase, FS Taq DNA Polymerase, Pfu DNA Polymerase và Fusion Pfu DNA Polymerase của chúng tôi cung cấp hiệu suất PCR có độ chính xác, hiệu quả và độ nhạy cao.Chúng tôi cũng có Long Taq DNA Polymerase để thực hiện PCR dài.
