 
|
Xây dựng thư viện NGS Lựa chọn và dọn dẹp kích thước DNA GDSPure Magbead
Thông tin chi tiết sản phẩm:
| Nguồn gốc: | Trung Quốc |
| Hàng hiệu: | GDSBio |
| Chứng nhận: | ISO9001, ISO13485 |
| Số mô hình: | NC1011, NC1012, NC1013 |
Thanh toán:
| Số lượng đặt hàng tối thiểu: | 1 hộp |
|---|---|
| chi tiết đóng gói: | gói nhỏ hoặc phân phối số lượng lớn hoặc OEM |
| Thời gian giao hàng: | 8 ngày làm việc |
| Điều khoản thanh toán: | L/C, D/A, D/P, T/T, Western Union, MoneyGram |
| Khả năng cung cấp: | 10000 Hộp / Hộp mỗi ngày |
|
Thông tin chi tiết |
|||
| Cổ phần: | Đúng | Con mèo. KHÔNG.: | NC1011, NC1012, NC1013 |
|---|---|---|---|
| Sự chỉ rõ: | 5ml, 60ml, 450ml | Ứng dụng: | Lựa chọn kích thước và dọn dẹp |
| Mục tiêu: | ADN | In logo: | Với In Logo |
| Gói vận chuyển: | đóng gói | Hạn sử dụng: | 2 năm |
| Điều kiện bảo quản: | Bảo quản ở 2-8°C | ||
| Điểm nổi bật: | Xây dựng Thư viện CE NGS,Magbead Dọn dẹp Xây dựng Thư viện NGS |
||
Mô tả sản phẩm
GDSPure DNA Selection Magbeads
Con mèo.Số: NC1011, NC1012, NC1013
Các thành phần
| Thành phần | NC1011 | NC1012 | NC1013 |
| GDSPure DNA Selection Magbeads | 5mL | 60mL | 450mL |
Kho
Thuốc thử này nên được giữ ở 2-8°C.Đừng đóng băng.Thời hạn sử dụng là 2 năm nếu chưa mở.
Sự miêu tả
GDSPure DNA Selection Magbead sử dụng các hạt siêu thuận từ hiệu suất cao và tỷ lệ đệm tuyệt vời để tinh sạch và chọn chính xác các đoạn DNA từ 150 bp đến 1000 bp hoặc thậm chí lớn hơn.Các nucleotide dư thừa, muối, enzyme và các tạp chất khác được đưa vào trong hoạt động xây dựng thư viện DNA sẽ được loại bỏ sau quy trình rửa đơn giản, để thu được các đoạn tinh khiết, có thể được sử dụng trực tiếp trong các ứng dụng tiếp theo như giải trình tự, lai tạo, PCR và enzyme tiêu hóa.GDSPure DNA Selection Magbeads có thể được sử dụng bằng các định dạng thủ công và tự động.
Ứng dụng
Lựa chọn và dọn dẹp kích thước cho giải trình tự Thế hệ tiếp theo (NGS), giải trình tự Sanger, qPCR, ddPCR và microarrays, v.v.
chuẩn bịWork trướctAnh taethí nghiệm
1. Dung dịch rửa: dung dịch ethanol 80% (V/V) tươi
2. Dung dịch rửa giải: nước không có nuclease hoặc TE Buffer
3. Xoáy nước
4. Giá đỡ nam châm
5. Để đảm bảo độ chính xác của dải lựa chọn, thể tích mẫu DNA phải ≥ 50 μL
6. Trước khi thí nghiệm, lấy các hạt từ tính ra khỏi tủ lạnh và làm ấm chúng ở nhiệt độ phòng trong hơn 20 phút trước khi sử dụng
giao thức
Lựa chọn kích thước của các đoạn DNA lớn hơn kích thước được chỉ định (Lựa chọn một mặt)
1. Chuẩn bị 50 μL mẫu DNA vào ống ly tâm thích hợp.
2. Thêm một lượng nhất định Hạt ngọc trai chọn lọc GDSPure DNA đã được treo lại theo 1stTỷ lệ bổ sung hạt trong Bảng 1 vào mẫu.Thổi nhẹ bằng pipet 10 lần (hoặc xoáy trong 30 giây).Ủ mẫu trong 5 phút ở nhiệt độ phòng.
Ví dụ: để chọn tất cả các mảnh lớn hơn 250 bp trong mẫu, hãy thêm huyền phù hạt từ tính 40 μL (0,80X).
3. Đặt ống lên giá nam châm thích hợp để tách các hạt ra khỏi phần nổi phía trên.Khi dung dịch trong, cẩn thận loại bỏ và loại bỏ phần nổi phía trên bằng pipet (không loại bỏ hạt).
4. Thêm 200 μl etanol 80% mới chuẩn bị vào ống khi đang ở trong giá đỡ từ tính.Ủ ở nhiệt độ phòng trong 30 giây, sau đó cẩn thận lấy ra và loại bỏ phần nổi phía trên (không làm xáo trộn các hạt).
5. Lặp lại Bước 4 một lần cho tổng cộng hai lần giặt.
Lưu ý: Đảm bảo loại bỏ tất cả chất lỏng nhìn thấy được sau lần giặt thứ hai.
6. Làm khô các hạt trong không khí cho đến khi bề mặt của các hạt từ tính không còn độ bóng rõ ràng trong khi ống nằm trên giá từ tính với nắp mở.
Lưu ý: Không làm khô hạt quá lâu, điều này có thể dẫn đến khả năng phục hồi DNA thấp hơn.Khi các hạt bắt đầu nứt, chúng quá khô.
7. Lấy ống ra khỏi giá đỡ từ tính.Rửa giải mục tiêu DNA từ các hạt vào 30-40 μl nước không có nuclease hoặc Bộ đệm TE.Trộn đều bằng cách hút lên và xuống ít nhất 10 lần hoặc trên máy trộn xoáy trong 30 giây.Ủ trong 3-5 phút ở nhiệt độ phòng.
8. Đặt ống lên giá nam châm.Sau 5 phút (hoặc khi dung dịch trong), chuyển phần nổi phía trên sang một ống mới.Việc lựa chọn đã hoàn tất và DNA được chọn có thể được sử dụng cho các thí nghiệm tiếp theo hoặc được bảo quản ở -20°C trong một thời gian dài.
Lựa chọn kích thước của các đoạn DNA trong các khoảng kích thước cụ thể (Lựa chọn hai mặt)
1. Chuẩn bị 50 μL mẫu DNA vào ống ly tâm thích hợp và dán nhãn là A.
2. Thêm một lượng nhất định Hạt ngọc trai chọn lọc GDSPure DNA đã được treo lại theo 1stTỷ lệ thêm hạt trong Bảng 1 vào ống A. Thổi nhẹ bằng pipet trong 10 lần (hoặc xoáy trong 30 giây).Ủ mẫu trong 5 phút ở nhiệt độ phòng.
Ví dụ: để chọn các đoạn có kích thước khoảng 250 bp trong mẫu, hãy thêm huyền phù hạt từ tính 40 μL (0,80X).
- Đặt ống A trên giá nam châm thích hợp để tách các hạt ra khỏi phần nổi phía trên.Khi dung dịch trong, cẩn thận hút phần nổi phía trên sang một ống mới và dán nhãn là B. Loại bỏ các hạt.
4. Thêm một lượng huyền phù hạt từ tính nhất định theo 2thứTỷ lệ thêm hạt trong Bảng 1 vào ống B. Thổi nhẹ bằng pipet trong 10 lần (hoặc xoáy trong 30 giây).Ủ mẫu trong 5 phút ở nhiệt độ phòng.
Ví dụ: để chọn các mảnh có kích thước khoảng 250 bp trong mẫu, hãy thêm huyền phù hạt từ tính 10 μL (0,20X).
5. Đặt ống B lên giá nam châm.Khi dung dịch trong, cẩn thận loại bỏ và loại bỏ phần nổi phía trên.
6. Thêm 200 μl etanol 80% mới chuẩn bị vào ống B khi đang ở trong giá đỡ từ tính.Ủ ở nhiệt độ phòng trong 30 giây, sau đó cẩn thận lấy ra và loại bỏ phần nổi phía trên (không làm xáo trộn các hạt).
7. Lặp lại Bước 6 một lần cho tổng cộng hai lần giặt.
Lưu ý: Đảm bảo loại bỏ tất cả chất lỏng nhìn thấy được sau lần giặt thứ hai.
8. Làm khô các hạt trong không khí cho đến khi bề mặt của các hạt từ tính không còn độ bóng rõ ràng trong khi ống nằm trên giá từ tính với nắp mở.
Lưu ý: Không làm khô hạt quá lâu, điều này có thể dẫn đến khả năng phục hồi DNA thấp hơn.Khi các hạt bắt đầu nứt, chúng quá khô.
9. Lấy ống B ra khỏi giá đỡ từ tính.Rửa giải mục tiêu DNA từ các hạt vào 30-40 μl nước không có nuclease hoặc Bộ đệm TE.Trộn đều bằng cách hút lên và xuống ít nhất 10 lần hoặc trên máy trộn xoáy trong 30 giây.Ủ trong 3-5 phút ở nhiệt độ phòng.
10. Đặt ống B lên giá nam châm.Sau 5 phút (hoặc khi dung dịch trong), chuyển phần nổi phía trên sang một ống mới.Việc lựa chọn đã hoàn tất và DNA được chọn có thể được sử dụng cho các thí nghiệm tiếp theo hoặc được bảo quản ở -20°C trong một thời gian dài.
Bảng 1: Các điều kiện khuyến nghị để chọn kích cỡ
| MỘTgần đúngSkích thước | 200 bp | 250 bp | 300 bp | 400 bp | 500 bp | 600 bp | 700 bp | |
| Tỷ lệ hạt | 1stBổ sung hạt | 0,90X | 0,80X | 0,70X | 0,60X | 0,55X | 0,50X | 0,45X |
| 2thứBổ sung hạt | 0,50X | 0,20X | 0,20X | 0,20X | 0,15X | 0,15X | 0,15X | |
ghi chú
1. Vui lòng đọc kỹ hướng dẫn trước khi sử dụng và vận hành theo hướng dẫn.
2. Ethanol trong ống ly tâm nên được loại bỏ càng nhiều càng tốt trước khi rửa giải để đảm bảo hiệu quả rửa giải.
3. Thể tích dung dịch rửa giải có thể được điều chỉnh theo yêu cầu thí nghiệm, nhưng không nhỏ hơn 20 μL.
4. Các hạt từ tính nên tránh ly tâm, đóng băng và các hoạt động khác.Trước khi sử dụng, huyền phù hạt có thể được trộn hoàn toàn bằng xoáy và các phương pháp khác, và đặt trong hơn 20 phút để làm ấm đến nhiệt độ phòng.
5. Tránh để chất lỏng bám trên nắp ống trong quá trình vận hành ống hút và xoáy để giảm sự mất mát DNA.
GDSBio là một công ty công nghệ cao tập trung vào phát triển, sản xuất và tiếp thị các sản phẩm khoa học đời sống chất lượng.Công ty có một dòng sản phẩm hoàn chỉnh, lấy công nghệ PCR làm cốt lõi, tập trung vào PCR thông thường, PCR định lượng huỳnh quang, xây dựng thư viện NGS, điện di axit nucleic và các công nghệ sinh học phân tử khác, đồng thời đã phát triển các thuốc thử nghiên cứu khoa học phân tử, nguyên liệu chẩn đoán in vitro phân tử. vật liệu, thuốc thử chiết xuất và phát hiện axit nucleic và các sản phẩm khác.
